English Title: Demonstration of ceramide induced effects by reverse translocation of a fluorescent protein kinase

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Abstract

In dieser Arbeit wurde zur Charakterisierung der Ceramid-vermittelten Signaltransduktionswege ein in-vivo Testsystem ausgearbeitet, mit dem die Modulationen des intrazellulären Ceramidstoffwechsels unter Echtzeitbedingungen abgeschätzt und untersucht werden konnten. Es wurde ein Assaysystem etabliert, das es ermöglicht, die Wirkung des Ceramids einschließlich anderer Stimulanzien auf die Translokation der phosphorylierenden PKC-alpha unter physiologischen Bedingungen zu verfolgen und näher zu charakterisieren. Die durchgeführten Untersuchungen ergaben folgendes Ergebnis: Ceramid führt zu einer reversen Translokation der durch Phorbolester aktivierten und an die Membran translozierten PKC-alpha. Desweiteren konnten in diesem in-vivo Testmodell zwei Verbindungen als Ceramidanaloga charakterisiert und ein potentieller Inhibitor der endogenen Ceramidgenerierung auf seine biologische Aktivität untersucht werden.

Translation of abstract (English)

In this study we could set up a new in-vivo cell model which enables us to investigate ceramide induced effects by reverse translocation of fluorescent PKC-alpha and gives us the possibility to test potent ceramide analogues and inhibitors of the ceramide mediated signal pathway in living cells.